2×PCR Master Karışımı (Boyasız)
PCR Master Mix, Taq DNA Polimeraz, dNTP karışımı MgCl2 ve optimize edilmiş tamponu içeren, kullanıma hazır bir tür geleneksel PCR önceden karıştırılmış çözeltidir.Reaksiyon sırasında amplifikasyon için yalnızca primer ve şablon eklenebilir, bu da deneyin işlem adımlarını büyük ölçüde basitleştirir.Bu ürün mükemmel stabilizatörler içerir ve 4°C'de 3 ay saklanabilir.PCR ürünü 3′-dA çıkıntıya sahiptir ve kolaylıkla T vektörüne klonlanabilir.
Depolama koşulları
Ürün iki yıl boyunca -25°C~ -15°C'de saklanmalıdır.
Özellikler
| Sadakat (Taq'a karşı) | 1× |
| Sıcak Başlangıç | No |
| Çıkıntı | 3 A |
| Polimeraz | Taq DNA Polimeraz |
| Reaksiyon Formatı | SuperMix veya Master Mix |
| Reaksiyon Hızı | Standart |
| ürün tipi | PCR Ana Karışımı (2×) |
Talimatlar
1.Reaksiyon Sistemi
| Bileşenler | Boyut (μL) |
| Şablon DNA'sı | Uygun |
| Astar 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Astar 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Ana Karışımı | 25 |
| ggh2O | 50'ye kadar |
2.Amplifikasyon Protokolü
| Döngü adımları | Sıcaklık (°C) | Zaman | Döngüler |
| Ön denatürasyon | 94°C | 5 dakika | 1 |
| Denatürasyon | 94°C | 30 saniye | 35 |
| Tavlama | 50-60°C | 30 saniye | |
| Eklenti | 72°C | 30-60sn/kb | |
| Son Uzatma | 72°C | 10 dakika | 1 |
Notlar:
1) Şablon kullanımı: 50-200 ng genomik DNA;0.1-10 ng plazmit DNA.
2) Mg2+Konsantrasyon: Bu ürün çoğu PCR reaksiyonuna uygun 3 mM MgCl2 içerir.
3) Tavlama sıcaklığı: Lütfen Primerlerin teorik Tm değerine bakınız.Tavlama sıcaklığı, astarın teorik değerinden 2-5 ° C daha düşük bir değere ayarlanabilir.
4) Uzatma süresi: Moleküler tanımlama için 30 sn/kb önerilir.Gen klonlaması için 60sn/kb önerilir.
Notlar
1.Güvenliğiniz ve sağlığınız için lütfen operasyon sırasında laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenler giyin.
2.Yalnızca araştırma amaçlıdır!
