Bst 2.0 DNA Polimeraz (Gliserol içermez, yüksek yoğunluklu)
Bst DNA polimeraz V2, 5'→3' DNA polimeraz aktivitesine ve güçlü zincir değiştirme aktivitesine sahip olan ancak 5'→3' eksonükleaz aktivitesi olmayan Bacillus stearothermophilus DNA Polimeraz I'den türetilir.Bst DNA Polimeraz V2, iplik yer değiştirmesi, izotermal amplifikasyon LAMP (Döngü aracılı izotermal amplifikasyon) ve hızlı sıralama için idealdir.Bu Bst DNA polimeraz V2, oda sıcaklığında DNA polimeraz aktivitesini inhibe etme kapasitesine sahiptir, böylece çalıştırılabilir ve reaksiyon sistemi oda sıcaklığında formüle edilebilir, spesifik olmayan amplifikasyonu önler ve reaksiyonun verimliliğini arttırır ve bu versiyon, liyofilize edilmelidir.Ek olarak, yüksek sıcaklıklarda aktivitesini serbest bırakabilme yeteneğine sahiptir ve böylece ayrı bir aktivasyon aşamasına olan ihtiyacı ortadan kaldırır.
Bileşenler
| Bileşen | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polimeraz V2 (Gliserol içermez) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 mL | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Tampon | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 3×10 mL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 2×10 ml |
Uygulamalar
1.LAMP izotermal amplifikasyonu
2.DNA sarmalı tek yer değiştirme reaksiyonu
3.Yüksek GC gen dizilimi
4.Nanogram seviyesinin DNA dizilimi.
Saklama Durumu
0°C'nin altında nakliye ve -25°C~-15°C'de saklanmalıdır.
Birim Tanımı
Bir birim, 65°C'de 30 dakika içinde asitte çözünmeyen malzemeye 25 nmol dNTP katan enzim miktarı olarak tanımlanır.
LAMBA Reaksiyonu
| Bileşenler | 25 μLSistem |
| 10×HC Bst V2 Tampon | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP'ler (her biri 10 mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Yeşil (25×)a | 1,0 μL |
| Astar karışımıb | 6 μL |
| Bst DNA Polimeraz V2 (Gliserolsüz) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Şablon | × μL |
| ddH₂O | 25 μL'ye kadar |
Notlar:
1 A.SYTOTM 16 Yeşil (25×): Deneysel ihtiyaçlara göre diğer boyalar ikame olarak kullanılabilir;
2)b.Primer karışımı: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ve diğer hacimlerin karıştırılmasıyla elde edilir.
Reaksiyon ve Durum
1 × HC Bst V2 Tamponu, inkübasyon sıcaklığı 60°C ila 65°C arasındadır.
Isı İnaktivasyonu
80°C, 20 dakika.
