Multipleks Bir Adım RT-qPCR Premix
Tanım
Kat No: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix, şablon olarak RNA'yı temel alan multipleks kantitatif bir PCR Kitidir.Deneyde, ters transkripsiyon ve kantitatif PCR aynı reaksiyon tüpünde gerçekleştirilerek deneysel işlemi basitleştirir ve kontaminasyon riskini azaltır.Tampon ve enzim karışımının benzersiz tasarımı, tek adımlı liyofilize sistemde kullanılabilir.Kit, kantitatif amplifikasyon için sıcak başlangıç Taq DNA Polimerazını kullanarak birinci iplikçik cDNA'nın verimli sentezi için ısıya dayanıklı Ters Transkriptaz'ı kullanır.Optimize edilmiş reaksiyon tamponu, enzim karışımı vb. içerir ve spesifik olmayan PCR amplifikasyonunu etkili bir şekilde inhibe eden ve birden fazla qPCR reaksiyonunun amplifikasyon verimliliğini artıran faktörler eklenerek, primerlerin amplifikasyon verimliliğini sağlarken birden fazla floresan kantitatif amplifikasyona olanak tanır.
Bileşenler
| İsim |
| 1. Lyo-Tampon |
| 2. Lyo-Enzim Karışımı |
| 3. Lyo koruyucusu |
Ulaşım durumuiyon
A: Lyo-tampon ve koruyucu: -25~-15°C, raf ömrü 1 yıldır.
B: Lyo-enzim karışımı, 2-8 °C, raf ömrü 6 aydır.
Çalıştırma talimatı
1. Reaksiyon Sistemi (Örnek olarak 25μL alın)
| Bileşenler | Hacim (μL) | Nihai Konsantrasyon |
| Lyo-Tampon | 6 | 1* |
| Lyo-Enzim Karışımı | 1 | - |
| Lyo-Koruyucu | 8 | - |
| Astar Karışımı (10μM) | 1 | 0,1-1uM |
| Prob Karışımı (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| RNA Şablonu | 5 | - |
| DEPC H2O | 25'e kadar | - |
2. Optimize Edilmiş Bisiklet Protokolü
1) Standart Bisiklet Protokolü
| Reaksiyon aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü | |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°Ca | 10 dk | 1 |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 5 dakika | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 15 saniye | 45 döngü |
| 60°Cb | 30 saniyec |
2) Hızlı Döngü Protokolü
|
| Reaksiyon aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°Ca | 2 dakika | 1 |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 2 saniye | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 1 saniye |
45 döngü |
| 60°Cb | 13 saniyec |
Not:
a) Tersi transkripsiyon: Sıcaklık 10-15 dakika süreyle 42°C veya 50°C olarak seçilebilir.
b) Amplifikasyon reaksiyonu: Tasarlanan primerlerin Tm değerine göre sıcaklık ayarlanır.
C)Floresan sinyal kazanma: Lütfen deneysel prosedürü gerekliliklere göre ayarlayın.enstrüman kılavuzu.
Teknik Bilgiler/Özellikler
| Sıcak Başlangıç | Dahili sıcak başlangıç |
| Algılama yöntemi | Astar probu tespiti |
| PCR yöntemi | Tek adımlı RT-qPCR |
| Örnek türü | RNA |
Notlar
1. Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
2. Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin！
