Bir Adım Hızlı RT-qPCR Probu Premix-UNG
Kat No: HCR5143A
Tek Adımlı RT-qPCR Prob Kiti (FOR FAST), şablon olarak RNA (RNA virüsü gibi) kullanan tek katlı veya çoklu kantitatif PCR için uygun, prob bazlı bir RT-qPCR hızlı tespit kitidir.Bu ürün, daha hızlı amplifikasyon hızına, daha yüksek amplifikasyon verimliliğine ve spesifikliğe sahip, hızlı amplifikasyon için optimize edilmiş bir tamponla birlikte yeni nesil antikorla modifiye edilmiş Taq DNA Polimeraz ve tek adımlı özel Ters Transkriptaz kullanır.Düşük ve yüksek konsantrasyonlu numunelerin hem tekli hem de çoklu olarak kısa sürede dengeli amplifikasyonunu destekler.
Bileşenler
1. 5×RT-qPCR tamponu (U+)
2. Enzim karışımı (U+)
Notlar:
A.5×RT-qPCR tamponu (U+) dNTP ve Mg içerir2+;
B.Enzim karışımı (U+), ters transkriptaz, Hot Start Taq DNA polimerazı, RNase inhibitörü ve UDG'yi içerir;
C.RNase içermeyen uçlar, EP tüpleri vb. kullanın.
Kullanmadan önce 5×RT-qPCR tamponunu (U+) iyice karıştırın.Çözüldükten sonra çökelme olursa, tamponun oda sıcaklığına dönmesini bekleyin, karıştırıp çözün ve ardından bunları normal şekilde kullanın.
Depolama koşulları
Ürün kuru buzla gönderilir ve -25~-15°C'de 1 yıl saklanabilir.
Talimatlar
1. Tepki Sistem
| Bileşenler | Hacim (20 μL reaksiyon) |
| 2 ×RT-qPCR arabelleği | 4μL |
| Enzim karışımı (U+) | 0.8μL |
| Astar İleri | 0,1~ 1,0μM |
| Astar Ters | 0,1~ 1,0μM |
| TaqMan Sondası | 0,05~0,25μM |
| Şablon | X μL |
| RNaz İçermeyen Su | 25μL'ye kadar |
Notlar: Reaksiyon hacmi 10-50μL'dir.
2. Bisiklet Protokolü (Sstandart)
| Döngü adım | Sıcaklık | Zaman | Döngüler |
| Ters Transkripsiyon | 55°C | 10 dk | 1 |
| İlk Denatürasyon | 95°C | 30 saniye | 1 |
| Denatürasyon | 95°C | 10 saniye | 45 |
| Tavlama/Uzatma | 60°C | 30 saniye |
| Bisiklet Protokolü (Hızlı) Döngü adım |
Sıcaklık |
Zaman |
Döngüler |
| Ters Transkripsiyon | 55°C | 5 dakika | 1 |
| İlk Denatürasyon | 95°C | 5 saniye | 1 |
| Denatürasyon | 95°C | 3 saniye | 43 |
| Tavlama/Uzatma | 60°C | 10 saniye |
Notlar:
A.Ters transkripsiyon sıcaklığı 50°C ila 60°C arasındadır, sıcaklığın arttırılması karmaşık yapıların ve yüksek CG içerikli şablonların güçlendirilmesine yardımcı olur;
B.Optimum tavlama sıcaklığının primerin Tm değerine göre ayarlanması ve Real Time PCR cihazına göre floresans sinyali toplama için en kısa sürenin seçilmesi gerekir.
Notlar
Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin!
