RNAz A
Ribonükleaz A(RNaseA), yaklaşık 13.7 kDa molekül ağırlığına sahip 4 disülfit bağı içeren tek sarmallı bir polipeptittir.RNase A, C ve U kalıntılarındaki tek sarmallı RNA'yı spesifik olarak parçalayan bir endoribonükleazdır.Spesifik olarak, bölünme, bir nükleotidin 5'-ribozu ve bitişik pirimidin nükleotidinin 3'-ribozu üzerindeki fosfat grubu tarafından oluşturulan fosfodiester bağını tanır, böylece 2,3'-Siklik fosfatlar karşılık gelen 3'e hidrolize edilir. 'nükleosid fosfatlar (örneğin, pG-pG-pC-pA-pG, pG-pG-pCp ve A-PG'yi oluşturmak için RNase A tarafından bölünür).RNaz A, tek sarmallı RNA'nın bölünmesinde en aktif olanıdır.Önerilen çalışma konsantrasyonu 1- 100 μ G/mL'dir ve çeşitli reaksiyon sistemleriyle uyumludur.Düşük tuz konsantrasyonu (0-100 mM NaCl), tek sarmallı RNA, çift sarmallı RNA ve RNA-DNA hibridizasyonuyla oluşturulan RNA zincirlerini kesmek için kullanılabilir.
Bununla birlikte, yüksek tuz konsantrasyonunda (≥0,3 M), RNaz A yalnızca spesifik olarak tek sarmallı RNA'yı böler.
RNase A, en yaygın olarak plazmid DNA veya genomik DNA'nın hazırlanması sırasında RNA'yı çıkarmak için kullanılır.Hazırlama işlemi sırasında DNazın aktif olup olmaması reaksiyonu kolaylıkla etkileyebilir.DNaz aktivitesini etkisiz hale getirmek için geleneksel su banyosunda kaynatma yöntemi kullanılabilir.Bu ürün DNaz ve proteaz içermez ve kullanım öncesinde ısıl işlem gerektirmez.Ayrıca bu ürün RNaz koruma analizi ve RNA dizi analizi gibi moleküler biyoloji deneylerinde de kullanılabilir.
Depolama koşulları
Ürün -25°C~-15°C'de 2 yıl süreyle saklanmalıdır.
Özellikler
| Dış görünüş | Pudra |
| Miktar | 100mg / 1g |
| Ürün tipi | RNaz A |
Talimatlar
Bu, RNase A depolama çözümünü hazırlamak için yaygın yöntemlerden biridir.Ayrıca hazırlanabilirLaboratuvardaki veya referans literatürdeki geleneksel yöntemlere göre diğer yöntemlerle (örn.doğrudan 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 veya Tris-NaCl çözeltisi içinde çözünüyor)
1. 10 mg/mL RNaz A depolama solüsyonu hazırlamak için 10 mM sodyum asetat (pH 5,2) kullanın.
2. 100°C'de 15 dakika süreyle ısıtma.
3. Oda sıcaklığına soğutun, 1/10 hacim 1 M Tris-HCl (pH 7,4) ekleyin, pH'ını 7,4'e ayarlayın (içinörneğin, 500 mL 10 mg/mL RNaz depolama çözeltisi 1 M Tris-HCl, pH7,4 ekleyin.
4. Dondurulmuş depolama için -20°C'de alt paketlenir ve 2 yıla kadar stabil olabilir.
[Notlar]:
RNaseA çözeltisi nötr koşullar altında kaynatıldığında, RNaz çökelmesi oluşacaktır;Daha düşük bir pH'da kaynatın ve eğer protein safsızlıklarının varlığından kaynaklanabilecek çökelme gözlemlenebilir.Kaynattıktan sonra çökelti bulunursa, yabancı maddeler yüksek hızlı santrifüjleme (13000 rpm) ile çıkarılabilir ve daha sonra dondurarak depolama için alt paketlenebilir.
Notlar
Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin.
