Ultra Nükleaz GMP dereceli
Kat No: HC2016A
UltraNuclease GMP sınıfı, GMP ortamları altında genetik olarak tasarlanıp hazırlanarak Escherichia coli'de (E.coli) ifade edilir ve saflaştırılır.Bilimsel araştırmalarda hücre süpernatanının ve hücre lizatının viskozitesini azaltabilir, protein saflaştırma verimliliğini artırabilir ve protein fonksiyonel araştırmasını geliştirebilir.Ürün aynı zamanda konakçı nükleik asit kalıntılarını pg derecesine indirgeyerek virüs saflaştırma, aşı üretimi ve protein/polisakarit farmasötik üretimi de dahil olmak üzere uygulamalardaki biyolojik ürünlerin performansını ve güvenliğini artırabilir.Ayrıca ürün, hücre terapisi ve aşı geliştirmede insan periferik kan mononükleer hücrelerinin (PBMC) topaklanmasını önlemek için de uygulanabiliyor.
UltraNuclease, renksiz, şeffaf bir sıvı görünümünde, tampon (20 mM Tris-HCL pH 8.0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, %50 gliserin) içerisinde elüte edilmiş, sterilize edilmiş bir reaktif formunda sağlanır.Bu ürün GMP proses gereksinimlerine uygun olarak üretilmekte ve sıvı formda sunulmaktadır.
Bileşenler
UltraNuclease GMP dereceli (250 U/μL)
Depolama koşulları
Ürün kuru buzla gönderilir ve -25°C~-15°C'de iki yıl saklanabilir.
Ürün açılmışsa ve bir haftadan uzun süre 4°C'de saklanmışsa filtrelemenizi öneririz.Ürün mikrobiyal kontaminasyonu önlemek için.
Özellikler
| İfade Ana Bilgisayarı | UltraNuclease genli rekombinant E. coli |
| Moleküler ağırlık | 26,5kDa |
| soelektrik noktası | 6.85 |
| Saflık | ≥%99 (SDS-SAYFA) |
| Depolama Arabelleği | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, %50 gliserin |
|
Birim Tanımı | Bir Aktivite biriminin (U) tanımı, kullanılan enzim miktarıdır.2,625 mL'de ΔA260'ın emilim değerini 30 dakikada 1,0 değiştirin37°C'de pH 8,0 olan reaksiyon sistemi (tam sindirime eşdeğer)37 μg somon sperm DNA'sının oligonükleotidlere dönüştürülmesi). |
Talimatlar
1. Örnek Toplamak
Yapışkan hücreler: ortamı çıkarın, hücreleri PBS ile yıkayın ve süpernatantı çıkarın.
Süspansiyon hücreleri: hücreleri santrifüjleme yoluyla toplayın, hücreleri PBS ile yıkayın, 6.000'de santrifüjleyin10 dakika rpm'de bekletildikten sonra pelleti toplayın.
Escherichia coli: bakterileri santrifüjleme yoluyla toplayın, bir kez PBS ile yıkayın, 8.000'de santrifüjleyin5 dakika boyunca devir/dakika yapın ve pelleti toplayın.
2. Örnek Tedavi
Toplanan hücre topaklarını kütle (g) hacim (mL) 1:(10-20) oranında lizis tamponuyla veya buz üzerinde veya oda sıcaklığında mekanik veya kimyasal yöntemlerle tedavi edin (1 g hücre peleti yaklaşık olarak içerir)
109 hücre).
3. Enzim Tedavisi
Reaksiyon sistemine 1-5 mM MgCl ekleyin ve pH'ı 8-9'a ayarlayın.
1 g hücre peletini sindirmek için 250 Birim oranına göre UltraNuclease ekleyin, 37°C'de 30 dakikadan fazla inkübe edin.Lütfen seçmek için “Önerilen Reaksiyon Süresi” formuna bakın.tedavi süresi.
4. Süpernatan Toplamak
12.000 rpm'de 30 dakika boyunca santrifüjleyin ve süpernatantı toplayın.
Not: Çözelti asidik veya alkali ise veya yüksek konsantrasyonda tuz, deterjan veyadenatürantlar, lütfen enzim dozajını artırın veya tedavi süresini buna göre uzatın.
Önerilen reaksiyon koşullarıons
| Parametre | Optimum Durum | Etkili Koşul |
| Mg²+Konsantrasyon | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Sıcaklık | 37°C | 0-42°C |
| DTT Konsantrasyonu | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol Konsantrasyonu | 0-100 mM | >0 mM |
| Tek Değerlikli Katyon Konsantrasyonu | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat İyon Konsantrasyonu | 0-10 mM | 0-100 mM |
Tavsiye edilen Reaksiyon Zaman (37°C, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNükleaz Miktarı (Son Konsantrasyon) | Reaksiyon süresi |
| 0,25 U/mL | >10 saat |
| 2,5 U/mL | >4 saat |
| 25 U/mL | 30 dk |
Notlar:
Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin!
