Bir Adım RT-qPCR SYBR Yeşil Premiks
Kat Numarası: HCB5140A
Tek Adımlı RT-qPCR Syber Green Premix, SYBR Green I boyasını temel alan floresans ölçümü içindir.Gene spesifik primerler kullanılarak ters transkripsiyon ve qPCR reaksiyonları tek tüpte tamamlanır, böylece tekrarlanan kapak açma ve pipetleme işlemlerine duyulan ihtiyaç ortadan kalkar, test verimliliği büyük ölçüde artar ve kontaminasyon riski azalır.RNA numuneleri için kit, verimli cDNA sentezi için ısıya dayanıklı Ters Transkriptaz ve kantitatif amplifikasyon için HotStart Taq DNA Polimeraz kullanır.Optimize edilmiş tampon sistemi altında, kitin hassasiyeti, yüksek oranda ifade edilen hedefler için 0,1 pg kadar yüksek, orta düzeyde ifade edilen hedefler için 1 pg kadar yüksek olabilir.Kit, DNA örneklerinin amplifikasyonu ve miktarının belirlenmesi için uygundur.Farklı bitki ve hayvan örneklerinden, hücrelerden ve mikroorganizmalardan alınan nükleik asitlerin hassas bir şekilde tespit edilmesini ve ölçülmesini sağlar.
Bileşenler
| No | İsim | Hacim | Hacim |
| 1 | Gelişmiş Tampon | 250 mcL | 2×1,25 mL |
| 2 | Gelişmiş Enzim Karışımı | 20 mcL | 200 mcL |
| 3 | RNaz Ücretsiz H2O | 250 mcL | 2×1,25 mL |
Depolama koşulları
Bu ürün 1 yıl boyunca ışıktan -25~-15°C'de saklanmalıdır.
Talimatlar
1. Reaksiyon sistemi konfigürasyonud
| Bileşenler | Hacim (μL) | Hacim (μL) | Nihai konsantrasyon |
| Gelişmiş Tampon | 12.5 | 25 | 1× |
| Gelişmiş Enzim Karışımı | 1 | 2 | - |
| İleri Astar (10 μmol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 µmol/L |
| Ters Astar (10 μmol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 µmol/L |
| RNA Tam Plakasıb | X | X | - |
| RNaz Ücretsiz H2Öc | 25'e kadar | 50'ye kadar | - |
Notlar:
1 A.TNihai primer konsantrasyonu 0,2 µmol/L idi ve bu aynı zamanda uygun şekilde 0,1 ile 1 µmol/L arasında da ayarlanabilir.
2)b.Reaktif, Toplam RNA'nın 1 pg-1μg aralığında olmasıyla son derece hassastır ve insan numuneleri üzerinde yapılan testler, uygun şekilde 15-30 aralığındaki genel Ct değerini kontrol ederek 1 pg-100 ng'lik optimal girdi gösterdi.
3) c.Hedef gen amplifikasyonunun geçerliliğini ve tekrarlanabilirliğini sağlamak için 20μL veya 50μL kullanılması önerilir.
4) d.Lütfen ultra temiz tezgahta hazırlayın ve nükleaz kalıntısı içermeyen uçlar ve reaksiyon tüpleri kullanın;filtre kartuşlu uçlar tavsiye edilir.Çapraz kontaminasyon ve aerosol kontaminasyonundan kaçının.
2.Reaksiyon programı
| Döngü adımı | Sıcaklık | Zaman | Döngüler |
| Ters transkripsiyon | 50°Ca | 6 dakika | 1 |
| İlk denatürasyon | 95°C | 5 dakika | 1 |
| Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 15 saniye | 40 |
| 60°Cb | 30 saniye | ||
| Erime eğrisi aşaması | Cihaz Varsayılanları | 1 | |
Notlar:
1 A.Ters transkripsiyon sıcaklığı deneysel ihtiyaçlara göre 50-55°C arasında seçilebilir.DNA örnekleri için ters transkripsiyon işlemi atlanabilir.
2)b.Özel durumlarda tavlama/uzama sıcaklığı primerin Tm değerine göre ayarlanabilir, 60°C tavsiye edilir.
Notlar
1. Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
2. Güvenliğiniz için lütfen laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenlerle çalışın.
